美国马普佛罗里达神经学研究所（Max Planck Florida Institute for Neuroscience）的研究人员最近创建了一个可准确和快速定位脑细胞中蛋白质的可量化、高效和低成本的方法——通过CRISPR/Cas9介导的同源定向修复单细胞标记内源性蛋白法（SLENDR）。研究成果5月12日在《细胞》杂志上在线发表^[1]。

该研究团队正在探索了解人脑学习和记忆时细胞发生变化的方法，但该领域的研究受到技术限制而无法定位和显示神经元单个蛋白的情况。这种被命名为SLENDR的新方法可以精确改造活体样本中的神经元DNA。在实验模型中，研究人员利用子宫内电击转染技术将CRISPR/Cas9系统插入到胚胎正在发育和分裂的产前大脑细胞中。断裂的DNA是通过同源定向修复（homology-directed repair，HDR）方法修复的，这让研究人员可以添加一个能使目标蛋白在显微镜下可见的基因。他们还可以用两种不同颜色同时来标记同一细胞中的两个不同的蛋白。

研究人员利用成像方法和DNA测序证实了SLENDR方法可精确敲入DNA中。在测试该新技术的同时，研究人员还用该方法成功观察到蛋白激酶C的α亚型从未被报道过的行为。因此，SLENDR被认为在未来将成为分子和细胞神经生物学的标准工具，它能帮助研究人员准确定位蛋白质亚细胞，从而判断蛋白质功能。                  

（郑颖）